Kolorimetrie
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LoslegenSynonym: Colorimetrie, Absorptionsphotometrie, Spektrophotometrie
Definition
Kolorimetrie ist eine Methode zur Konzentrationsbestimmung, die auf der Absorption von Licht in einem bestimmten Wellenlängenbereich beruht (Extinktion). Kolorimetrische Messungen werden mithilfe eines Photometers durchgeführt.
Messprinzip
Ein Lichtstrahl bestimmter Wellenlänge wird auf eine Probe (z.B. Lösung in Küvette oder Multiwell-Platten) projiziert. Der enthaltene Stoff absorbiert einen Teil der elektromagnetischen Strahlung, die Stärke der Absorption korreliert dabei direkt mit der Stoffkonzentration. Zur Berechnung der absoluten Stoffkonzentration werden meist parallel Proben mit bekannter Stoffkonzentration analysiert (Standardreihe bzw. Verdünnungsreihe).
Die Kalkulation der Stoffkonzentration beruht auf dem Lambert-Beer'schen Gesetz.
Einschränkungen
Die Korrelation zwischen Extinktion und Stoffkonzentration beschränkt sich nur auf einen bestimmten Konzentrationsbereich, dieser wird als linearer Bereich bezeichnet. Zu hoch konzentrierte Proben müssen daher bei Bedarf vor der kolorimetrischen Konzentrationsbestimmung verdünnt werden.